裸鼠成瘤实验在肿瘤研究中具有不可替代的作用,它不仅可以揭示肿瘤的生物学特性,还可以为药物研发和治疗方案制定提供重要依据。
进行裸鼠成瘤实验的原因主要有以下几点:
研究肿瘤生物学特性:人体肿瘤移植于免疫缺陷的裸鼠体内后,能保持其生物学特性,可以观察和研究肿瘤细胞在体内的生长、转移等生物学行为,这对于理解肿瘤的发生、发展机制具有重要意义。
评估肿瘤生长和侵袭能力:可以直观地展示肿瘤在体内的生长速度和侵袭范围,为评估肿瘤的生长和侵袭能力提供直接证据。这对于制定和调整治疗方案具有指导意义。
药物敏感性研究:在裸鼠体内形成的肿瘤模型可以用于研究人体肿瘤对药物的敏感性。通过给予不同的治疗药物,观察肿瘤的生长变化,可以评估药物的疗效和毒性,为开发新的肿瘤治疗方法和药物提供重要的实验数据。
易于控制和重复实验:裸鼠作为模型物种,具有易于维护、繁殖数量大、易存活等特点。这使得实验条件易于控制,实验结果易于重复,从而提高了实验的可靠性和准确性。
裸鼠成瘤实验中的细胞准备与接种:
细胞状态:确保所选用的细胞处于对数生长期,细胞密度达到80词90%左右时收集。收集细胞前一天晚上更换新鲜培养基,确保细胞处于良好的生长状态中。细胞活性是影响实验结果的关键因素,必须选用活性高的肿瘤细胞,并避免使用已长时间传代的细胞。
细胞消化与洗涤:使用胰酶消化细胞后,用预冷的笔叠厂洗涤两遍,以清除残留的血清和胰酶。洗涤过程中应轻柔操作,避免对细胞造成损伤。
细胞悬液制备:将细胞沉淀用笔叠厂或无血清培养基吹打至合适的浓度。
接种技巧:
1.接种前将细胞悬液充分吹散,防止细胞成团。
2.选择血供丰富的部位进行接种,如腋窝中后部。接种时针头应深入皮下约1肠尘,并在皮下左右滑动几次,使细胞接种成团。
3.接种后应轻轻按压接种部位,防止细胞悬液从针眼溢出。
4.为减缓细胞凋亡,整个接种过程应将细胞悬液置于冰上。